產(chǎn)品簡介:
蘇木素(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯(lián)合染色簡稱HE染色,是病理學(xué)和組織學(xué)zui常用的一種染色方法。蘇木精為堿性天然染料,可使細胞核著色。細胞核內(nèi)染色質(zhì)的主要成分是DNA,在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。
NobleRyder Gill蘇木素染色液(Gill No.2)又稱GillⅡ液,屬半氧化蘇木素染色液,蘇木精濃度是Gill 蘇木素染色液的1倍,屬進行性染色,故染色后不需鹽酸乙醇分化。特別適用于細胞學(xué)涂片染色,染色約3~5min,亦可用于石蠟切片染色,石蠟切片染色時間應(yīng)大于15min,較少用于臨床診斷的制片染色。該染色液的缺點是黏附的明膠甚至玻片本身都會著色。
染色原理:
1、細胞核染色的原理:
蘇木素為堿性天然染料,可使細胞核著色。細胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA,在DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。
2、細胞漿染色的原理:
伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料,在一定條件下可使細胞漿著色。細胞漿的主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合物,細胞漿的染色與染液的pH值密切相關(guān)。當染色液pH值在胞漿蛋白質(zhì)等電點(4.7~5.0)以下時,胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離,則細胞漿帶正電荷,就可被帶負電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子,與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽離子結(jié)合,使細胞漿著色,呈現(xiàn)紅色。
3、分化作用:
染色后,用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去,這個過程稱為分化作用,所用的溶液稱為分化液。在HE染色中常用1%鹽酸乙醇作為分化液,因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu),使組織與色素分離而退色。大多數(shù)組織經(jīng)蘇木素染色后,必須用1%鹽酸乙醇分化,使細胞核過多結(jié)合的蘇木素染料和細胞漿吸附的蘇木素染料脫去,再進行伊紅染色,才能保證細胞核與細胞漿染色的分明。
4、返藍作用:
分化之后,蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),呈紅色;在堿性條件下處于藍色離子狀態(tài),呈藍色。組織切片經(jīng)酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色,立即用水除去組織切片上的酸而中止分化,再用弱堿性水使蘇木素染上的細胞核呈現(xiàn)藍色,這個過程稱為返藍作用或藍化作用。另外用自來水浸洗也可使細胞核返藍,但所需時間較長。
產(chǎn)品組成:
編號 名稱 | D05811 | D5811 | Storage |
100ml | 500ml | RT 避光 | |
使用說明書 | 1份 |
自備材料:
1、鹽酸乙醇分化液
2、藍化液,如稀氨水、碳酸鋰溶液等
3、系列乙醇
操作步驟(僅供參考):
1、根據(jù)實驗具體需求操作。
2、無需鹽酸乙醇分化,細胞涂片染色時間一般3~5min ,石蠟切片染色時間一般15~20min。
注意事項:
1、切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。系列乙醇應(yīng)經(jīng)常更換新液。
2、冷凍切片染色時間盡量要短。
3、藍化液常使用0.2~1%氨水或Scott促藍液或0.1~1%碳酸鋰溶液。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期:12個月有效。
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