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你對(duì)Percoll的了解有多少呢
更新時(shí)間:2019-04-17   點(diǎn)擊次數(shù):1968次
   你們對(duì)于Percoll有多少了解呢?不了解也沒(méi)關(guān)系,下面我們就來(lái)看看Percoll的各種優(yōu)點(diǎn)及功能吧。

  Percoll分層液屬于Perco,是經(jīng)過(guò)聚乙烯吡咯烷酮 (polyvinyl pyrolidone, PVP) 處理的硅膠顆粒混懸液,為ll分層液。

  Percoll是經(jīng)過(guò)聚乙烯吡咯烷酮 (polyvinyl pyrolidone, PVP) 處理的硅膠顆粒混懸液,對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性和刺激性。Percoll混懸液的硅膠顆粒大小不一,經(jīng)過(guò)高速離心后,可形成一個(gè)連續(xù)密度梯度,將比重不同的細(xì)胞分離純化。

  將1份10XPBS與9份Percoll貯存液混合,制成等滲Percoll懸液,此懸液被認(rèn)為是99.99%Percoll懸液,其密度為1.1294g/ml。用PBS或細(xì)胞培養(yǎng)液稀釋99.99%Percoll而獲得所需密度的Percoll分離液用于相應(yīng)細(xì)胞的分離。若分離淋巴細(xì)胞應(yīng)使用1.0777g/ml,配制時(shí)用稀釋液稀釋60%即可。

  取比重1.077的Percoll分離液X ml與離心管中,將等倍稀釋的抗凝血1/2 X ml 小心疊加在分離液上,經(jīng)水平離心(1500rpm)后,便得四個(gè)細(xì)胞層,從而分離出淋巴細(xì)胞。表層為死細(xì)胞殘片和血小板,底層為粒細(xì)胞和紅細(xì)胞,中間有兩層,上層富含單核細(xì)胞,下層富含淋巴細(xì)胞。

  Percoll的優(yōu)點(diǎn)分析

  該法是純化淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的一種較好的方法,淋巴細(xì)胞純度高達(dá)98%,單核細(xì)胞純度可達(dá)78%。

  因?yàn)镻ercoll具有滲透性低、不穿透細(xì)胞、粘度低、密度高和無(wú)毒害等優(yōu)點(diǎn),與目前常用的密度梯度離心介質(zhì),包括蔗糖(Sucrose)、血清白蛋白(Serum albumin, ALB)、聚蔗糖(Ficoll)、氯化銫(CsCl)等相比,是目前較理想的介質(zhì)。Percoll密度梯度離心已被多次成功地用于動(dòng)物細(xì)胞及其細(xì)胞器的分離,純化了包括人血液細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、紅血球細(xì)胞、白血球細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、肝細(xì)胞等在內(nèi)的十余種動(dòng)物細(xì)胞。這一技術(shù)也開(kāi)始用于用于分離和純化植物原生質(zhì)體、核、葉綠體和線(xiàn)粒體。

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