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分享一下Ficoll和Percoll的區(qū)別
更新時(shí)間:2019-05-20   點(diǎn)擊次數(shù):7475次
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  Percoll和淋巴細(xì)胞分離液(淋分)都是利用細(xì)胞密度不同來(lái)分離細(xì)胞的,但是percoll區(qū)分的密度梯度更多,就是如果幾種細(xì)胞密度相差不多時(shí),percoll依然能分開(kāi),可是普通的淋分就無(wú)能為力了,也可以認(rèn)為,percoll分離的細(xì)胞純度更高,

  Ficoll與Percoll均為密度梯度離心法

  ①Ficoll-Hypaque密度梯度離心法:人外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞,其體積、形狀和比重與其他細(xì)胞不同,紅細(xì)胞和多核白細(xì)胞比重較大,為1.092左右,而淋巴細(xì)胞和單個(gè)核細(xì)胞比重為1.075左右。利用密度在1.077±0.001g/L之間近于等滲的Ficoll-Hypaque混合溶液(稱(chēng)為淋巴細(xì)胞分層液)作密度梯度離心時(shí),各種血液成分將按密度梯度重新分布聚集。血漿和血小板由于密度較低,故懸浮于分層液的上部;紅細(xì)胞與粒細(xì)胞由于密度較大,故沉于分層液的底部;PBMC密度稍低于分層液,故位于分層液界面上,這樣就可獲得PBMC。

  ②Percoll密度梯度離心法:Percoll是Pharmacia公司的商品名,成分為硅化聚乙烯吡咯烷酮(PVP),為無(wú)毒,無(wú)刺激的新型密度梯度離心分離劑。聚乙烯吡咯酮包被的硅膠混懸液,它具有易成等滲、粘度低、無(wú)毒性、不引起細(xì)胞聚集等優(yōu)點(diǎn),已得到廣泛引用。由于Percoll在培養(yǎng)基中顆粒大小不等,其在離心過(guò)程中自然形成密度梯度,從而將不同密度的細(xì)胞分離出來(lái)。將1份10×PBS與9份percoll儲(chǔ)存液混合,制成等滲Percoll懸液,此懸液被認(rèn)為是100 % Percoll懸液,其密度為1.1294g/ml,可通過(guò)用PBS(1x)或組織培養(yǎng)液稀釋此99.99%Percoll而獲得適宜密度進(jìn)行細(xì)胞分離,因?yàn)橄♂尪扰c密度線性相關(guān)

  一句話總結(jié):Ficoll只能分離出密度在1.077±0.001g/L之間的淋巴細(xì)胞,PERCOLL能將全血中的多種細(xì)胞分離出來(lái),若只分離淋巴細(xì)胞,可以用普通淋巴細(xì)胞分離液

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