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分享一下瓊脂糖凝膠的特點是什么
更新時間:2019-06-06   點擊次數:2274次
   瓊脂糖凝膠是以瓊脂糖為支持介質制備的凝膠。瓊脂糖分為一般瓊脂糖和經化學修飾后熔點降低的低熔點瓊脂 糖,瓊脂糖的熔點在62?65°C之間,融化后在37°C下可維持液態數小時,30°C時凝固成膠。多用于對染色體DNA在凝膠內進行原位酶切及DNA段回收。瓊脂糖凝膠 由于孔徑大常用于大分子蛋白質、DNA的分離。

  下面我們一起來看看瓊脂糖凝膠的特點有哪些吧。

  天然瓊脂(agar)是一種多聚糖,主要由瓊脂糖(agarose,約占80%)及瓊脂膠(agaropectin)組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質,不帶電荷,而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖,由于這些基團帶有電荷,在電場作用下能產生較強的電滲現象,加之硫酸根可與某些蛋白質作用而影響電泳速度及分離效果。因此,目前多用瓊脂糖為電泳支持物進行平板電泳,其優點如下。

  1. 瓊脂糖凝膠電泳操作簡單,電泳速度快,樣品不需事先處理就可以進行電泳。

  2. 瓊脂糖凝膠結構均勻,含水量大(約占98%~99%),近似自由電泳,樣品擴散較自由電流,對樣品吸附極微,因此電泳圖譜清晰,分辨率高,重復性好。

  3. 瓊脂糖透明無紫外吸收,電泳過程和結果可直接用紫外光燈檢測及定量測定。

  4. 電泳后區帶易染色,樣品極易洗脫,便于定量測定。制成干膜可長期保存。

  目前,常用瓊脂糖作為電泳支持物,分離蛋白質和同工酶。將瓊脂糖電泳與免疫化學相結合,發展成免疫電泳技術,能鑒別其他方法不能鑒別的復雜體系,由于建立了超微量技術,0.1ug蛋白質就可檢出。

  瓊脂糖凝膠電泳也常用于分離、鑒定核酸,如DNA鑒定,DNA限制性內切核酸酶圖譜制作等。由于這種方法操作方便,設備簡單,需樣品量少,分辨能力高,已成為基因工程研究中常用實驗方法之一。

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