1、血清蛋白電泳
新鮮血清經(jīng)電泳后可地描繪出患者蛋白質(zhì)的全貌,有助于許多臨床疾病判斷的參考,在各類教材書上已清晰的描述了各種病理現(xiàn)象所顯現(xiàn)的圖像,一般常見的是白蛋白降低,某個球蛋白區(qū)域升高,提示不同的臨床意義。如球蛋白多克隆(poly-clonal)增高,β-γ融合的橋連現(xiàn)象,在γ區(qū)呈現(xiàn)細(xì)而密的寡克隆(oligoclonal)區(qū)帶,及由單一克隆漿細(xì)胞異常增殖所產(chǎn)生的單克隆(monoclonal)免疫球蛋白區(qū)帶,又稱M蛋白(Monoclonal Protein)帶,血清蛋白電泳是其實驗診斷方法。
血清蛋白電泳目前常用的檢查方法是醋酸纖維膜電泳法。
2、免疫固定電泳
血清免疫固定電泳(Immunofixation, IF)技術(shù)是血清蛋白質(zhì)在瓊脂糖凝膠介質(zhì)上經(jīng)電泳分離后,應(yīng)用蛋白質(zhì)固定劑和各型免疫球蛋白及其輕鏈抗血清,加于凝膠表面的泳道上,經(jīng)孵育和擴散后,若有對應(yīng)的抗原存在,則在適應(yīng)位置形成抗原抗體復(fù)合物并沉淀下來。染色后蛋白質(zhì)電泳參考泳道和抗原抗體沉淀區(qū)帶被氨基黑著色,根據(jù)電泳移動距離分離出單克隆組份,可對各類免疫球蛋白及其輕鏈進(jìn)行分型。血清免疫固定電泳技術(shù)用于M蛋白的型、亞型和輕鏈型,本周(Bence-Jonse)蛋白和游離輕鏈的分型和鑒別。
3、同工酶電泳
血清乳酸脫氫酶同工酶電泳
血清肌酸激酶及其亞型同工酶電泳
血清堿性磷酸酶同工酶電泳
血清堿性磷酸酶同工酶電泳具有三種不同結(jié)構(gòu)的基因編碼或在轉(zhuǎn)移后修飾的結(jié)果,按其氨基酸序列可分為小腸型、胎盤型和組織非特異型(肝、腎、骨),它們各自表達(dá)產(chǎn)物可在血清中呈現(xiàn),具有不同的意義。利用麥胚凝集素(wheat germ agglutinin, WGA)與ALP-L1和ALP-B糖鏈親和力的不同,血清與WGA作用再經(jīng)電泳后可將ALP同工酶予以分離。肝外膽道阻塞轉(zhuǎn)移肝癌時,高分子ALP(ALP-L2)明顯增高,在原發(fā)性肝癌時肝型ALP(ALP-L1)明顯增高,骨轉(zhuǎn)移性癌時ALP-B增高。
4、脂蛋白電泳
應(yīng)用自動電泳系統(tǒng)可將血清中脂蛋白組份進(jìn)行分離,呈現(xiàn)LDL、VLDL和HDL條帶,輸入TC值,計算各種脂蛋白中膽固醇含量,LDL-C/HDL-C比值在正常人群組與冠心病患者組存在顯著差異(p<0.001);診斷臨界值(cut-off point)為3.89,診斷靈敏度76.7%,特異性79.8%。LDL-C/HDL-C比值是粥樣硬化性冠脈疾病重要的危險因子之一,明顯優(yōu)于膽固醇或其它血脂的單個含量指標(biāo),且隨比值的增加,患冠脈疾病的危險性相應(yīng)增大。
在凝膠中脂蛋白的等電點不同,不僅可區(qū)分α,前β和β區(qū)帶,又因介質(zhì)中含有抗LP(a)抗體及陽離子存在,抗LP(a)抗體與患者血清中LP(a)結(jié)合形成復(fù)合物,陽離子則抑制其它脂蛋白的泳動速度,LP(a)便與其它脂蛋白分離開來。清晰的LP(a)條帶呈現(xiàn)在前β與γ區(qū)域之間,陽性條帶掃描后,可獲得區(qū)帶的面積及其百分含量,提高了對心、腦血管獨立的危險因子LP(a)檢測的敏感性和特異性。
5、血紅蛋白電泳
血紅蛋白電泳可使正常血紅蛋白HbA與HbA2分離,也可檢測出大部分異常血紅蛋白如:HbS、HbD、HbC和HbE。當(dāng)HbA2、HbC和HbE>20%時,則難以分離和鑒別。應(yīng)先用堿性瓊脂糖凝膠血紅蛋白電泳進(jìn)行正常和異常血紅蛋白的分離和檢測,通常用于孕婦的篩選,然后再進(jìn)行酸性瓊脂糖凝膠血紅蛋白電泳,對異常血紅蛋白予以分離和鑒別。
血紅蛋白遺傳性分子病常分為異常Hb病和地中海貧血兩大類。異常Hb病如鐮狀細(xì)胞貧血,在堿性緩沖液中異常HbS電泳區(qū)帶的位置呈現(xiàn)在HbA與HbA2之間,異常血紅蛋白的HbC和HbE電泳遷移率都十分緩慢,HbC和HbA2可重疊。在PH6.2的枸櫞酸緩沖液的是瓊脂糖介質(zhì)電泳中,由于HbC不能與HbA分離,這樣就可檢測出HbE。異常血紅蛋白HbD是在堿性緩沖液中其電泳遷移率如同HbS,而在PH6.2枸櫞酸緩沖液的瓊脂糖介質(zhì)中,因HbS與HbA不能分離,這樣就可以分離和檢測出HbD。β-地中海貧血是HbA的合成受損,電泳圖譜可呈現(xiàn)HbA2與HbF區(qū)帶。