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免疫血清的制備是常用的免疫學實驗技術
更新時間:2020-12-03   點擊次數:1638次
  免疫血清的制備是常用的免疫學實驗技術。高效價、高特異性的免疫血清可作為免疫學診斷的試劑(如用于制備免疫標記抗體等),也可供特異性免疫治療用。
 
  免疫血清的效價高低取決于實驗動物的免疫反應性及抗原的免疫原性。如以免疫原性強的抗原刺激高應答性的機體,常可獲得高效價的免疫血清。
 
  而使用免疫原性弱的抗原免疫時,則需同時加用佐劑以增強抗原的免疫原性。免疫血清的特異性主要取決于免疫用抗原的純度。
 
  因此,如欲獲得高特異性的免疫血清,必須予先純化抗原。此外,抗原的劑量、免疫途徑及注射抗原的時間間隔等,也是影響免疫血清效價的重要因素應予重視。
 
  原理
 
  具有免疫原性的抗原可刺激機體相應B細胞增殖、分化形成漿細胞并分泌特異性抗體。由于抗原分子表面的不同決定簇為不同特異性的B細胞克隆所識別,因此由某一抗原刺激機體后產生的抗體,實際上為針對該抗原分子表面不同決定簇的抗體混合物(即多克隆抗體)。
 
  另外,抗體的產生具有回憶應答的規律性,牨m現為初次免疫注射與再次免疫注射后的抗體應答特點截然不同。是由于記憶性B細胞參與再次應答所致。
 
  免疫用的抗原必須經FCA或FIA充分乳化后才能注射,否則將明顯影響抗原的免疫效果。上述制備乳化抗原的方法較費時、費力。采用H-81微型振蕩混合器法或三腔管研磨法制備。
 
  前者是將抗原液與佐劑按比例混合后,置于混合器上使之劇烈振蕩(頻率2900轉/分,振幅6mm);后者是將免疫用的佐劑和抗原液按比例混合后,吸入注射器內再將注射器連接于三腔管上反復抽吸研磨。這兩種方法約1小時即可使抗原充分乳化。

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