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產(chǎn)品展示
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SDS-PAGE蛋白電泳套裝 NobleRyder P0400

  • 型   號:
  • 價   格:
  • 更新時間:2024-08-28
  • 廠家性質:經(jīng)銷商

北京諾博萊德科技有限公司供應SDS-PAGE蛋白電泳套裝 NobleRyder P0400量大優(yōu)惠,咨詢 :

 

 

 

SDS-PAGE蛋白電泳套裝 NobleRyder P0400

 

 

北京諾博萊德科技有限公司供應SDS-PAGE蛋白電泳套裝 NobleRyder P0400量大優(yōu)惠,咨詢 :      1215878164

  

北京諾博萊德科技有限公司位于北京市海淀區(qū),是一家專業(yè)從事生化試劑、分子生物學試劑、實驗耗材及實驗儀器研發(fā)、銷售、服務為一體的生物科技公司,公司主要經(jīng)營的進口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, FermantasMBI, NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等;產(chǎn)品涉及化工原料、生化試劑、分子克隆相關試劑、細胞培養(yǎng)及檢測常用試劑、實驗室常用耗材及儀器。

SDS-PAGE蛋白電泳套裝 NobleRyder P0400

 

SDS-PAGE蛋白電泳套裝

 

名稱

規(guī)格

保存條件

5×蛋白上樣緩沖液(含DTT

1ml

-20

Tris-甘氨酸蛋白電泳緩沖液

一包(10L

RT

30%丙烯酰胺(29:1)

100mlX2

2-8

1.5mol/LTris(pH8.8)

100mlX2

RT

1.0mol/LTris(pH6.8)

60ml

RT

過硫酸銨干粉

2g

RT

10%SDS

10ml

RT

TEMED

1.5ml

RT

說明書

一份

一份

 

 

 

 

 

 

產(chǎn)品簡介

本公司提供的蛋白電泳套裝包含凝膠制備,蛋白上樣緩沖液及蛋白電泳上樣緩沖液。

本公司生產(chǎn)的SDS-PAGE蛋白電泳套裝是按照經(jīng)典方法配制而成。本套裝根據(jù)電泳體系的大小,可進行約50次左右。

使用說明:

一,前期工作:蛋白提取及定量。

二,蛋白上樣液的制備:蛋白上樣緩沖液解凍,輕輕混勻,按4體積蛋白樣品加入一體積的5×蛋白上樣緩沖液,混勻,沸水中水浴5分鐘。

三,電泳液的配制:將一包電泳液干粉全部倒入1L2L的燒柄中,加一定量的水溶解成2L配成5×Tris-甘氨酸蛋白電泳緩沖液,用前再稀釋5倍或者先配成1L成為10×Tris-甘氨酸蛋白電泳緩沖液,用前再稀釋10倍。

四,10-151.5ml離心管,將過硫酸銨干粉分裝成100mg/支,標記好備用。

五,凝膠制備:

1,  取一支稱好的100mg過硫酸銨干粉,加入1ml蒸餾水,混勻,此配好的10%過硫酸銨溶液2-8度可保存一周,一周后請用新的。洗干凈電泳玻璃板,夾好。

2,  根據(jù)目標蛋白分子量大小,選取凝膠濃度,按下表配制。先配分離膠,再配濃縮膠。

 

 

分離膠15%

分離膠12%

分離膠10%

分離膠8%

濃縮膠(5%)

總體積

10ml

10ml

10ml

10ml

5ml

30%丙烯酰胺(29:1)

5ml

4ml

3.3ml

2.7ml

0.83ml

1M Tris-HCL (PH6.8)

0

0

0

0

0.625ml

1.5M Tris-HCL(PH8.8)

2.5ml

2.5ml

2.5ml

2.5ml

0

10%SDS

100ul

100ul

100ul

100ul

50ul

ddH2O

2.3ml

3.3ml

4.0ml

4.6ml

3.42ml

10%過硫酸銨

100ul

100ul

100ul

100ul

75ul

TEMED

10ul

10ul

10ul

10ul

7.5ul

 

注意:

1TEMED10%過硫酸銨zui后加,在加入前需混勻前面所加試劑。10%過硫酸銨在4有效期為一周,TEMED易揮發(fā),使用后請蓋緊瓶蓋。在常溫下膠30分鐘內可以凝固,如溫度過低,可放37溫箱凝固。灌完分離膠后,輕輕的加1ml ddH2O封上層,膠凝固后可見到分界線。灌濃縮膠前,先傾去水層,再用吸紙吸干。濃縮膠灌好后立刻插入梳子。濃縮膠凝固后,放入電泳液中讓電泳液漫過加樣孔,輕輕的撥出梳子,可防加樣孔變形。

2,配制量可按上表等比加減。如果所用膠濃度與上面不同,可自行調整,主要是調整30%丙烯酰胺的量(需要濃度×總體積/30%),zui后用水補足總體積。

六,上樣,電泳,一般是濃縮膠80V,分離膠120V恒壓,等溴酚蘭電泳到合適的位置,結束電泳,染色或者進行下一步實驗。

 附:SDS-PAGE分離膠的濃度與*分離范圍

SDS-PAGE分離膠濃度

*分離范圍

6%

57-212kD

8%

36-94kD

10%

20-80kD

12%

12-60kD

15%

10-43kD


配制6%的PAGE分離膠

成分

所需各成分的體積(毫升)

凝膠體積

5

10

15

20

25

30

蒸餾水

2.6

5.3

7.9

10.6

13.2

15.9

30%丙烯酰胺混合液

1.0

2.0

3.0

4.0

5

6.0

1.5mol/L Tris(pH8.8)

1.3

2.5

3.8

5.0

6.3

7.5

10%SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

10%過硫酸銨

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

TEMED

0.004

0.008

0.012

0.016

0.02

0.024


配制8%的PAGE分離膠

成分

所需各成分的體積(毫升)

凝膠體積

5

10

15

20

25

30

蒸餾水

2.3

4.6

6.9

9.3

11.5

13.9

30%丙烯酰胺混合液

1.3

2.7

4.0

5.3

6.7

8.0

1.5mol/L Tris(pH8.8)

1.3

2.5

3.8

5.0

6.3

7.5

10%SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

10%過硫酸銨

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

TEMED

0.003

0.006

0.009

0.012

0.015

0.018


配制10%的PAGE分離膠

成分

所需各成分的體積(毫升)

凝膠體積

5

10

15

20

25

30

蒸餾水

1.9

4.0

5.9

7.9

9.9

11.9

30%丙烯酰胺混合液

1.7

3.3

5.0

6.7

8.3

10.0

1.5mol/L Tris(pH8.8)

1.3

2.5

3.8

5.0

6.3

7.5

10%SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

10%過硫酸銨

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

TEMED

0.002

0.004

0.006

0.008

0.01

0.012


配制12%的PAGE分離膠

成分

所需各成分的體積(毫升)

凝膠體積

5

10

15

20

25

30

蒸餾水

1.6

3.3

4.9

6.6

8.2

9.9

30%丙烯酰胺混合液

2.0

4.0

6.0

8.0

10.0

12.0

1.5mol/L Tris(pH8.8)

1.3

2.5

3.8

5.0

6.3

7.5

10%SDS

0.05

0.1

0.015

0.2

0.25

0.3

10%過硫酸銨

0.05

0.1

0.015

0.2

0.25

0.3

TEMED

0.002

0.004

0.006

0.008

0.01

0.012


配制15%的PAGE分離膠

成分

所需各成分的體積(毫升)

凝膠體積

5

10

15

20

25

30

蒸餾水

1.1

2.3

3.4

4.6

5.7

6.9

30%丙烯酰胺混合液

2.5

5.0

7.5

10.0

12.5

15.0

1.5mol/L Tris(pH8.8)

1.3

2.5

3.8

5.0

6.3

7.5

10%SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

10%過硫酸銨

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

TEMED

0.002

0.004

0.006

0.008

0.001

0.012


3. 按照如下表格配制SDS-PAGE的濃縮膠(也稱上層膠、積層膠或堆積膠)
                   
                                      配制不同體積的濃縮膠

成分

所需各成分的體積(毫升)

凝膠體積

2

3

4

5

6

8

蒸餾水

1.4

2.1

2.7

3.4

4.1

5.5

30%丙烯酰胺混合液

0.33

0.5

0.67

0.83

1.0

1.3

1.0mol/L Tris(pH6.8)

0.25

0.38

0.5

0.63

0.75

1.0

10%SDS

0.02

0.03

0.04

0.05

0.06

0.08

10%過硫酸銨

0.02

0.03

0.04

0.05

0.06

0.08

TEMED

0.002

0.003

0.004

0.005

0.006

0.008

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