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NobleRyder 常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色液

  • 型   號(hào):P2818
  • 價(jià)   格:
  • 更新時(shí)間:2024-09-26
  • 廠家性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商

NobleRyder 常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色液
NobleRyder 即用型液體試劑 P2818-100ml
NobleRyder 即用型液體試劑 P2818-500ml

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

考馬斯亮藍(lán)染色液(Commassie Blue Staining Solution)是以考馬斯亮藍(lán)R250為染料可用于SDS-PAGE 或非變性PAGE等蛋白電泳膠的常規(guī)染色或Western轉(zhuǎn)膜后PAGE 膠上殘余蛋白的檢測(cè)。采用常規(guī)染色方法需至少1h,采用快速染色方法一般數(shù)分鐘即可。本染色液經(jīng)過(guò)改良,不含有毒的甲醇,但含有刺激性氣味的乙酸。

NobleRyder 常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色液  

產(chǎn)品組成:

編號(hào)

名稱(chēng)

P2818

P2818

Storage

Commassie Blue Staining Solution

100ml

500ml

RT

使用說(shuō)明書(shū)

1份

自備材料:

1、水平搖床或側(cè)擺搖床

2、蒸餾水

3、20%甘油水溶液

4、(可選)加熱裝置

操作步驟(僅供參考):

(一)常規(guī)染色脫色方法

1、PAGE 電泳結(jié)束后取凝膠放入適量考馬斯亮藍(lán)染色液中,確保染色液可以充分覆蓋凝膠。

2、置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng),室溫染色1 小時(shí)或更長(zhǎng)時(shí)間。具體的染色時(shí)間取決于凝膠的厚度和染色時(shí)的溫度。凝膠較厚,溫度較低,則染色時(shí)間宜適當(dāng)延長(zhǎng)。凝膠較薄,溫度較高,則染色時(shí)間可以適當(dāng)縮短。通常染色至凝膠的顏色和染色液的顏色非常接近,在染色液中幾乎看不清凝膠時(shí),可以認(rèn)為已染色充分。染色2~4個(gè)小時(shí)或更長(zhǎng)時(shí)間不會(huì)對(duì)最終的染色效果產(chǎn)生負(fù)面影響。

3、倒出染色液。染色液可以回收重復(fù)使用2~3 次。

4、加入適量脫色液,確保脫色液可以充分覆蓋凝膠。NobleRyder推薦脫色液的配斱是:40%乙醇,10%乙酸,50%蒸餾水。

5、置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng),室溫脫色4~24h。期間更換脫色液2~4 次,直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去,并且蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期。通常蛋白條帶在脫色1~2h 后即可出現(xiàn)。

6、完成脫色后把凝膠保存在水中,用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會(huì)發(fā)生溶漲。如需避免溶漲,可以把膠保存在含20%甘油水溶液中,長(zhǎng)期保存可以制備干膠。

()快速染色脫色方法

1、PAGE 電泳結(jié)束后取膠放入適量考馬斯亮藍(lán)染色液中,微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰,立即停止加熱。通常對(duì)于膠濃度大于10%的膠比較堅(jiān)韌,在發(fā)生煮沸時(shí)不易破損;對(duì)于膠濃度小于10%的膠,宜盡量避免煮沸,以免出現(xiàn)膠碎裂的情況。

2、隨后在染色液溫度較高的情況下,在室溫?fù)u床上搖動(dòng)5~10min。

3、倒出染色液。染色液可以回收重復(fù)使用2~3 次。

4、加入適量脫色液,確保染色液可以充分覆蓋凝膠。NobleRyder推薦脫色液的配斱是:40%乙醇,10%乙酸,50%蒸餾水。

5、微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰,立即停止加熱。

6、 隨后在脫色液溫度較高的情況下,在搖床上搖動(dòng)5~10min。此時(shí)通常可以觀察到比較清楚的蛋白條帶。

7、更換新鮮的脫色液,重復(fù)步驟5 和步驟6,直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去,蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期。

8、 完成脫色后,把凝膠保存在水中,用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會(huì)發(fā)生溶漲。如需避免溶漲,可以把膠保存在含20%甘油水溶液中,長(zhǎng)期保存可以制備干膠。

注意事項(xiàng):

1、染色時(shí),如果把凝膠和染色液一起放置在微波爐中適當(dāng)加熱,可以大大加快染色速度。但加熱時(shí)宜盡量避免沸騰,以免出現(xiàn)因暴沸而導(dǎo)致的凝膠碎裂。

2、脫色期間可以在脫色液中加入一片吸水紙,可以使部分染料吸附在吸水紙上,加快脫色。脫色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)也會(huì)導(dǎo)致蛋白條帶的顏色變淺。

3、如果希望染色的背景更低,希望獲得更加清晰的蛋白條帶,可以加入適量的室溫蒸餾水進(jìn)行洗滌。通過(guò)蒸餾水洗滌可以進(jìn)一步降低背景。在4℃蒸餾水中浸泡過(guò)夜可以獲得背景更低,條帶更清晰的條帶。在次日對(duì)4℃蒸餾水浸泡過(guò)夜的已經(jīng)進(jìn)行了染色的凝膠再同前一天一樣進(jìn)行染色和洗滌可以進(jìn)一步改善染色效果,獲得更好的考染蛋白條帶。

4、常規(guī)染色脫色方法耗時(shí)較長(zhǎng),但檢測(cè)靈敏度更高,染色效果更加穩(wěn)定??焖偃旧撋椒ㄍǔz測(cè)靈敏度略低,并且在微波爐加熱的過(guò)程中有時(shí)會(huì)出現(xiàn)暴沸導(dǎo)致凝膠碎裂的情況,需特別注意。另外微波爐加熱導(dǎo)致的高溫會(huì)引起染色液和脫色液中的乙酸的揮發(fā),。

5、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

有效期:12個(gè)月有效。

NobleRyder 常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色液 

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