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NobleRyder 常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒

  • 型   號:P2820
  • 價   格:
  • 更新時間:2024-09-26
  • 廠家性質(zhì):經(jīng)銷商

NobleRyder 常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒 即用型液體試劑 P2820-600ml

常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒

產(chǎn)品簡介:

常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒(Commassie Blue Staining Kit)采用了*經(jīng)典的考馬斯亮藍(lán)R250染色和脫色方法,可用于SDS-PAGE或非變性PAGE等蛋白電泳凝膠的常規(guī)染色和脫色或Western轉(zhuǎn)膜后PAGE膠上殘余蛋白的檢測。

常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒中的染色液和脫色液經(jīng)過改良,不含有毒的甲醇,含有刺激性氣味的乙酸。采用常規(guī)染色脫色方法累計時間達(dá)到2~3h后可以觀察到蛋白條帶,采用快速染色脫色方法20min左右即可觀察到蛋白條帶。如果想觀察到更清晰的蛋白條帶則需延長染色、脫色時間。

 NobleRyder 常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒 

產(chǎn)品組成:

                         編號         

名稱

P2820

600ml

Storage

試劑(A): Commassie Blue Stain

100ml

RT

試劑(B): Commassie Blue脫色液

500ml

RT

使用說明書

1份

 

自備材料:

1、水平搖床或側(cè)擺搖床

2、蒸餾水

3、20%甘油水溶液

 

操作步驟(僅供參考)

(一)常規(guī)染色脫色方法

1、PAGE電泳后取凝膠放入適量Commassie Blue Stain中,確保染色液充分覆蓋凝膠。

2、置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動,室溫染色1h或更長時間。具體的染色時間取決于凝膠的厚度和染色時的溫度。凝膠較厚,溫度較低,則染色時間宜適當(dāng)延長。凝膠較薄,溫度較高,則染色時間可以適當(dāng)縮短。通常染色至凝膠的顏色和染色液的顏色非常接近,在染色液中幾乎看不清凝膠時,可以認(rèn)為已染色充分。染色2~4h或更長時間不會對最終的染色效果產(chǎn)生負(fù)面影響。

3、倒出染色液,該染色液可以回收重復(fù)使用2~3次。

4、加入適量Commassie Blue脫色液,確保脫色液可以充分覆蓋凝膠。

5、置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動,室溫脫色4~24h。期間更換脫色液2~4次,直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去,并且蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期。通常蛋白條帶在脫色1~2h后即可出現(xiàn)。脫色期間可以在脫色液中加入一片吸水紙,可以使部分染料吸附在吸水紙上,加快脫色。脫色時間過長也會導(dǎo)致蛋白條帶的顏色變淺。

6、完成脫色后把凝膠保存在水中,用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會發(fā)生溶漲。如需避免溶漲,可以把膠保存在含20%甘油水溶液中,長期保存可以制備干膠。

(二)快速染色脫色方法

1、PAGE電泳結(jié)束后取膠放入Commassie Blue stain中,微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰,立即停止加熱。通常對于膠濃度大于10%的膠比較堅韌,在發(fā)生煮沸時不易破損;對于膠濃度小于10%的膠,宜盡量避免煮沸,以免出現(xiàn)膠碎裂的情況。

2、隨后在染色液溫度較高的情況下,在室溫?fù)u床上搖動5~10min。

3、倒出染色液,染色液可以回收重復(fù)使用2~3次。

4、加入適量Commassie Blue脫色液,確保脫色液可以充分覆蓋凝膠。

5、微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰,立即停止加熱。

6、隨后在脫色液溫度較高的情況下,在搖床上搖動5~10min。此時通常可以觀察到比較清楚的蛋白條帶。

7、更換新鮮的脫色液,重復(fù)步驟5和步驟6,直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去,蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期。

8、完成脫色后,把凝膠保存在水中,用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會發(fā)生溶漲。如需避免溶漲,可以把膠保存在含20%甘油水溶液中,長期保存可以制備干膠。

 

注意事項:

1.染色時如果把凝膠和染色液一起放置在微波爐中適當(dāng)加熱,可以大大加快染色速度。但加熱時宜盡量避免沸騰,以免出現(xiàn)因暴沸而導(dǎo)致的凝膠碎裂。

2.如果希望染色的背景更低,希望獲得更加清晰的蛋白條帶,可以加入適量的室溫蒸餾水進(jìn)行洗滌。通過蒸餾水洗滌可以進(jìn)一步降低背景。在4℃蒸餾水中浸泡過夜可以獲得背景更低,條帶更清晰的條帶。在次日對4℃蒸餾水浸泡過夜的已經(jīng)進(jìn)行了染色的凝膠再同前一天一樣進(jìn)行染色和洗滌可以進(jìn)一步改善染色效果,獲得更好的考染蛋白條帶。

3.常規(guī)染色脫色方法耗時較長,但檢測靈敏度更高,染色效果更加穩(wěn)定。快速染色脫色方法通常檢測靈敏度略低,并且在微波爐加熱的過程中有時會出現(xiàn)暴沸導(dǎo)致凝膠碎裂的情況,需特別注意。另外微波爐加熱導(dǎo)致的高溫會引起染色液和脫色液中的乙酸的揮發(fā)。

4.本染色液呈酸性,有輕微腐蝕性,使用時請作必要防護(hù)。

5.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

有效期: 12個月有效。

NobleRyder 常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒 

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