NobleRyder BCA蛋白定量試劑盒
NobleRyder BCA蛋白定量試劑盒 NobleRyder 即用型液體試劑 P2801-250TNobleRyder 即用型液體試劑 P2801-500T
BCA 蛋白定量試劑盒
產品簡介:
目前世界上*常用的蛋白濃度檢測方法是:BCA蛋白定量試劑盒(BCA Protein Assay Kit)和 Bradford 蛋白定量試劑盒(Bradford Protein Assay Kit)。BCA 法與傳統方法相比,更簡單、更穩定、更靈敏。BCA法測定蛋白濃度兼容性亦很好,不受大部分樣本中其他成分的影響,對于5%以內的SDS、Triton X-100、Tween 20、Tween 80具有很好的兼容性。BCA法測定蛋白濃度易受螯合劑、高濃度的還原劑影響。在 BCA 法測定蛋白濃度前,應盡量使 EDTA濃度≤m10M; DTT濃度≤1mM,2-ME≤0.01%。
NobleRyder BCA Protein Assay Kit在50~1000μg/ml濃度范圍內有較好的線性關系,其最小檢出量為25μg/ml。
NobleRyder BCA蛋白定量試劑盒
產品組成:
編號 名稱 | P2801 250T | P2801 500T | Storage |
試劑(A): BCA 試劑 A | 50ml | 100ml | RT 避光 |
試劑(B): BCA 試劑 B | 1.5ml | 3ml | RT |
試劑(C): 蛋白標準液(5mg/ml BSA) | 0.5ml | 1ml | -20℃ |
使用說明書 | 1份 |
自備材料:
1、酶標儀或分光光度計
2、 96 孔板或離心管
3、恒溫箱
操作步驟(僅供參考):
1. 取適量 5mg/ml 蛋白標準,用 0.9%NaCl 或 PBS 稀釋至終濃度為 0.5mg/ml。稀釋后的 0.5mg/ml 蛋白標準也可以-20℃長期保存。
2.根據樣品數量,按 50 體積 A 液加 1 體積 B 液配制適量 BCA 工作液,充分混勻。例如 5mlA 液加 100µlB 液,混勻,配制成 5.1ml 工作液。工作液室溫 24 小時內穩定。
3. 將標準品按 0、1、2、4、8、12、16、20µl 加到 96 孔板的標準品孔中,加標準品稀釋液,補足到 20µl。
4. 加適當體積樣品到 96 孔板的樣品孔中,加標準品稀釋液到 20µl。
5. 各孔加入 200µlBCA 工作液,37℃放置 30 分鐘。
注:也可以室溫放置 2 小時,或 60℃放置 30 分鐘。BCA 法測定蛋白濃度時,顏色會隨著時間的延長不斷加深。并且顯色反應會因溫度升高而加快。如果濃度較低,適合在較高溫度孵育,或適當延長孵育時間。
6. 測定 A562,540-595nm 之間的波長也可。根據標準曲線計算出樣品的蛋白濃度。
注意事項:
1. 需酶標儀一臺,測定波長為 540-595nm 之間,562nm 最佳。需 96 孔板。也可以使用普通的分光光度計測定,但測定時,需根據比色皿的最小檢測體積,適當加大 BCA 工作液的用量使其不小于最小檢測體積,樣品和標準品的用量可相應按比例放大也可不變。使用分光光度計測定蛋白濃度時,每個試劑盒可以測定的樣品數量可能會顯著減少。
2. 如發現樣品稀釋液或裂解液本身就有較高背景,請本公司生產的 Bradford 蛋白濃度測定試劑盒。
3. 為了加快 BCA 法測定蛋白濃度的速度可以適當用微波爐加熱,但是切勿過熱。
4.EDTA濃度必需小于 10mM,不兼容 EGTA。
5. 為了您的安全和健康,請穿戴實驗服和一次性手套。
有效期: 12 個月有效。蛋白標準溶液-20℃凍存。
NobleRyder BCA蛋白定量試劑盒